El gen narG y el operón moa (ABCDE) como posibles reguladores de la respiración anaeróbica del nitrato, en Escherichia coli K1

Resumen

Las mutaciones narC-8 y narC-78, ambas en el operón narC(narGHJI), confieren el fenotipo Nit- y bloquean la expresión de la fusión transcripcional F(moa::lac)25, en E.coli K12. Ambas mutaciones fueron estudiadas comparativamente en el presente trabajo e identificadas como narG-. Los análisis de dominancia en trans mostraron que los niveles de restauración Nit+ fueron influenciados por el crecimiento con molibdeno, la mutación particular y el genotipo bacteriano. El ensayo de inmunoelectroforesis indicó diferencias en el reconocimiento de la subunidad a de la NRA. El mapeo por ligamiento reveló el orden secuencial .. narG-78.. narG-8 ... trp. Los análisis genéticos con cepas isogénicas evidenciaron que, la recombinación sustitutiva de narG- por narG+, restauró la expresión de la fusión y viceversa. Los análisis de dominancia en trans con cepas isogénicas mostraron, sorpresivamente, que la restauración Nit+ fue (i) mediada por el operón moa(ABCDE)+ y (ii) condicionada por la mutación doble F(moa::lac)25 narG-78. Los resultados obtenidos confirmaron el papel regulador de narG+ sobre la expresión transcripcional de moa, y sugirieron un posible papel regulador de ambos (narG,moa) en la respiración del nitrato.